小鼠1-磷酸鞘氨醇試劑盒檢測原理:
小鼠1-磷酸鞘氨醇試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被對稱性1-磷酸鞘氨醇(S1P)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的對稱性1-磷酸鞘氨醇(S1P)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
小鼠1-磷酸鞘氨醇試劑盒操作：
小鼠1-磷酸鞘氨醇試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到精確的結果。
小鼠1-磷酸鞘氨醇試劑盒：
1、靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為1.0 nmol/L。
2、特異性：不與其它細胞因子反應。
3、重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
文章關鍵詞：小鼠1-磷酸鞘氨醇(S1P)ELISA試劑盒,盒操作,操作注意事項?
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